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細(xì)胞表面染色實驗操作流程是什么?

 更新時間:2023-10-20 點擊量:501

你知道細(xì)胞表面染色實驗操作流程是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、細(xì)胞計數(shù)

將培養(yǎng)好的細(xì)胞收集于15mL離心管并計數(shù);500g離心4min,去上清。

二、制備單細(xì)胞懸液

將收集的細(xì)胞用1mL 0.5%BSA/PBS溶液重懸,400g離心3min,去上清,重復(fù)2次;用0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞至濃度1x106個細(xì)胞/mL,分配到96孔板中,每孔100μl細(xì)胞懸液。

三、阻斷Fc受體

室溫孵育10-20min

四、一抗孵育

每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl2-8℃反應(yīng)30min。

五、洗滌

400g離心5min,去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸,離心去上清,重復(fù)兩遍。

六、二抗孵育

對于非熒光染料直標(biāo)抗體,加入100μl熒光二抗重懸,避光2-8℃反應(yīng)30min。對于直標(biāo)抗體直接跳到步驟八。

七、洗滌

400g離心5min,去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸,離心去上清,重復(fù)兩遍。

八、重懸細(xì)胞

200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞,4℃保存,上機分析。

更多有關(guān)細(xì)胞表面染色實驗的操作流程,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:



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